1 范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了牛冷凍精液人工授精技術(shù)要求。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于通遼地區(qū)養(yǎng)牛場(chǎng)（戶）和人工授精站。
2 規(guī)范性引用文件
下列文件對(duì)于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。
GB/T 5458 液氮生物容器
NY/T 1335 牛人工授精技術(shù)規(guī)程
DB1505/T 074 牛妊娠診斷技術(shù)規(guī)程
3 術(shù)語和定義
下列術(shù)語和定義適用于本標(biāo)準(zhǔn)。
3.1 冷凍精液
指利用器械以人工方法采集種公牛精液，經(jīng)過檢查、稀釋、平衡并利用液氮冷凍、保存。
3.2 解凍
冷凍精液細(xì)管直接置于38℃～40℃水浴中，恢復(fù)精子活力的處理方法。
3.3 人工授精
是指利用器械以人工方法采集種公牛精液，經(jīng)過檢查、稀釋、平衡、冷凍、保存及解凍等的特定處理后，用器械輸入發(fā)情母牛的生殖道中，使母牛妊娠的一種繁殖技術(shù)。
3.4 發(fā)情鑒定
通過觀察或檢查母牛外部行為征兆和內(nèi)部生殖器官變化，判斷卵巢卵子發(fā)育和排出等活動(dòng)情況和發(fā)情階段。
3.5 妊娠檢查
通過母牛外部征兆觀察、直腸檢查和儀器檢查等確定母牛是否妊娠的技術(shù)。
4 母牛發(fā)情鑒定
4.1 外觀表現(xiàn)
通過觀察母牛外部行為征兆判斷母牛發(fā)情階段，見附錄A。
4.2 直腸檢查
通過直腸檢查卵巢、觸摸卵泡發(fā)育狀況，判斷母牛發(fā)情排卵時(shí)間，見附錄B。
4.3 電子發(fā)情監(jiān)測(cè)法
將母牛行為監(jiān)測(cè)儀安放在母牛的適當(dāng)部位，采集母牛的行為活動(dòng)量；將觸發(fā)天線安裝于母牛出入口，當(dāng)母牛經(jīng)過觸發(fā)天線時(shí)，激活母牛行為檢測(cè)儀，并將母牛身份和母牛行為活動(dòng)量等識(shí)別信息數(shù)據(jù)經(jīng)過編碼、調(diào)制后發(fā)送至無線讀寫控制器；計(jì)算機(jī)管理信息系統(tǒng)軟件通過對(duì)各個(gè)母牛行為活動(dòng)量掌握牛只的發(fā)情狀況、配種時(shí)間。
4.4 尾根噴漆法
將鑒定母牛每天在尾跟上部噴漆或?qū)Ｓ孟灩P涂抹，根據(jù)有漆和無漆確定母牛發(fā)情。記錄發(fā)情牛的第一次穩(wěn)爬時(shí)間、發(fā)情結(jié)束時(shí)間以及發(fā)情持續(xù)時(shí)間。準(zhǔn)確推算適時(shí)配種。
4.5 適時(shí)輸精
母牛接受爬跨行為后10h～15h第一次輸精,然后隔8h～12h可再輸一次。
5 凍精質(zhì)量、貯存和運(yùn)輸
5.1 凍精質(zhì)量
5.1.1 活力、密度、有效精子數(shù)、畸形率、細(xì)菌數(shù)等質(zhì)量符合NY/T 1335要求。
5.1.2 細(xì)管完整，字跡清楚，應(yīng)有生產(chǎn)單位簡(jiǎn)稱、品種、編號(hào)、生產(chǎn)日期。
5.1.3 裝細(xì)管凍精的紗布口袋干凈，標(biāo)簽清楚。
5.1.4 凍精在購進(jìn)、入庫和輸精前進(jìn)行質(zhì)量檢測(cè)。
5.2 凍精貯存
凍精貯存于液氮生物容器（液氮罐）的液氮中。液氮罐應(yīng)符合GB/T 5458的規(guī)定。及時(shí)添加液氮，保證凍精始終浸在液氮中，保持液氮面高于凍精。應(yīng)經(jīng)常檢查液氮罐的狀況，保證液氮容器完好，液氮罐出現(xiàn)外殼結(jié)白霜應(yīng)立即更換。定期清洗液氮罐。
5.3 凍精運(yùn)輸
運(yùn)輸凍精時(shí)，應(yīng)使用專用液氮容器（有保護(hù)外套）,添滿液氮，固定容器蓋，液氮罐不得倒放及碰撞和強(qiáng)烈震蕩。遠(yuǎn)途運(yùn)輸凍精時(shí)，備足液氮，及時(shí)補(bǔ)加。
6 輸精前準(zhǔn)備
6.1 母牛保定
將待輸精的母牛保定, 尾巴向右上方拴系提起。
6.2 選取凍精
取下液氮罐蓋，選擇所需凍精筒或凍精紗布袋。用鑷子準(zhǔn)確選出所需的凍精，核對(duì)細(xì)管凍精標(biāo)記的公牛編號(hào)，應(yīng)與預(yù)配公牛號(hào)相符。迅速放置恒溫水浴鍋中解凍，凍精在液氮外停留時(shí)間不應(yīng)超過5s。蓋上液氮罐蓋。
6.3 解凍
6.3.1 凍精解凍溫度應(yīng)在38℃～40℃,時(shí)間是15s～20s。凍精的棉塞端朝下在恒溫水浴鍋中緩慢搖動(dòng)。
6.3.2 解凍后精液應(yīng)在1h內(nèi)及時(shí)輸精。冬季外界溫度低時(shí)應(yīng)做好精液保溫。
6.4 裝輸精槍
6.4.1 凍精解凍后,用紙巾吸干。
6.4.2 持細(xì)管的末端,應(yīng)盡快地將細(xì)管的棉塞端穿入輸精槍（采用塑料套管式金屬輸精器）內(nèi)。將裝好的授精槍垂直握住,用潔凈、干燥剪刀剪切凍精細(xì)管封口端10mm處。
6.4.3 取出槍套將槍管套上,用手捻槍套向下直到槍的圓錐座處,只觸摸槍套的開口端,以保持接觸牛的一端清潔。應(yīng)使用具有雙層保護(hù)的輸精槍外套。
7 輸精
7.1 輸精員應(yīng)修剪指甲。
7.2 母牛在輸精前外陰部應(yīng)用清水清洗,然后用 0.3‰新潔爾滅溶液或酒精棉球消毒,待干燥后,再用生理鹽水棉球擦拭。
7.3 發(fā)情母牛每次輸入1支解凍后的冷凍精液。
7.4 采用直腸把握子宮頸深部輸精法。輸精員一只手戴上一次性長臂手套,用水沾濕,手呈錐形,手心向上伸入直腸后手心轉(zhuǎn)下,找到并握住子宮頸,同時(shí)臂肘向下輕壓,使陰門張開。另一只手將輸精器插入陰道,先自陰門向前向上插入約13cm～17cm,再向前向下插入,兩手相互配合,使輸精器尖端對(duì)準(zhǔn)子宮頸口, 緩緩導(dǎo)入子宮頸內(nèi)5cm～8cm,然后注入精液,亦可在進(jìn)入子宮頸內(nèi)口1cm～4cm的子宮體部輸精。輸精應(yīng)做到輕入、慢注、緩出。
8 做好配種記錄
記錄應(yīng)及時(shí)、準(zhǔn)確，見表1。
表1 母牛配種記錄表
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序號(hào) |
畜 主 姓 名 |
畜 主 住 址 |
牛 耳 號(hào) |
母 牛 品 種 |
母 牛 年 齡 |
母 牛 胎 次 |
發(fā) 情 時(shí) 間 |
輸 精 時(shí) 間 |
凍 精 編 號(hào) |
凍 精 來 源 |
復(fù) 配 時(shí) 間 |
預(yù) 產(chǎn) 期 |
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9 妊娠檢查
采用外部觀察法和直腸檢查法，執(zhí)行DB1505/T 074。
10 效果評(píng)定指標(biāo)
第一情期受胎率：指第一情期輸精后，妊娠母牛頭數(shù)占輸精母牛頭數(shù)的百分比。
第一情期受胎率=
平均情期受胎率=
總受胎率=
產(chǎn)犢率=
犢牛成活率=
繁殖成活率=